一步法DNA文庫構建試劑盒采用優化的緩沖體系使裂解液中的DNA特異的結合到硅基質離心吸附柱上,PCR和其他酶促反應的抑制劑可通過兩步洗滌步驟被有效去除,使用低鹽緩沖液或水洗脫,即可得到高純度DNA。
本試劑盒適合于從新鮮或冷凍的抗凝血液樣品中提取高純度總DNA。本品可純化獲得分子量為50kb的DNA片段,純化過程不需使用苯酚等有毒溶劑,無需乙醇沉淀。
一步法DNA文庫構建試劑盒的主要有以下三大核心優勢:
1.起始量低:樣本低至1ng就可以完成建庫,建庫的成功率接近100%,數據分析后均一性≥95.0%;
2.構建高質量文庫:所有反應試劑均采取嚴格的質量控制和功能驗證,確保產品的較佳質量,更大程度上保證文庫構建的穩定性和重復性;
3.即用型試劑:一步法DNA文庫構建試劑盒中的所有試劑均為即用型試劑,極大簡化了操作過程,提高了操作效率和產量,并減少了污染和誤差發生。
一步法DNA文庫構建試劑盒需要注意:
?。?)電泳時,要選用合適的DNALadder,以保證電泳后可以準確定位所需分子量的DNA。用試劑盒構建黏粒文庫時,就可以直接采用文庫構建試劑盒內的ControlInsertDNA來做marker,既方便又準確。
?。?)電泳以后,應該避免用紫外光照射目標DNA,紫外光照射DNA會顯著降低克隆效率。解決方法:把marker所在的部分凝膠切下,在紫外燈下做好記號,然后以此為參考定位所需的片段。
?。?)回收DNA的時候,應該要避免過度離心,以防止DNA被剪切,降低文庫質量。