DNaseI是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA產生單脫氧核苷酸或單鏈或雙鏈的寡脫氧核苷酸的核酸內切酶。水解單鏈或雙鏈DNA后的產物,5'端為磷酸基團,3'端為羥基?;钚砸蕾囉阝}離子,并能被鎂離子或二價錳離子激活。鎂離子存在條件下,可隨機剪切雙鏈DNA的任意位點;二價錳離子存在條件下,可在同一位點剪切DNA雙鏈,形成平末端,或1-2個核苷酸突出的粘末端。
產品特點:
1.簡單快速,條件經過優化,一般15分鐘可以消化清除硅膠膜上殘留DNA。
2.確保RNasefree,可以保證RNA分子完整性。
3.兼容性廣,可整合進所有硅膠膜離心柱式RNA提取試劑盒柱上消化,不需要提取到總RNA后再單獨去除里面的殘留DNA。
DNaseI的注意事項:
1.經常更換新手套,因皮膚可能導致RNase污染。
2.使用無RNase的塑料制品和槍頭,避免交叉污染。
3.RNA在裂解液RZ中時不會被RNase降解,但提取后繼續處理過程中應使用不含RNase的塑料和玻璃器皿,玻璃器皿可在150℃烘烤4h,塑料器皿可在0.5MNaOH中浸泡10min,然后用水徹底洗凈,再高壓滅菌。
4.配制溶液應使用無RNase的水,(將水加到干凈的玻璃瓶中,加入DEPC至終濃度0.1%(V/V)放置過夜,高壓滅菌)
5.樣品應避免反復凍融,否則會影響RNA的提取得率和質量。
6.本試劑盒不能用于冷凍血液RNA的提取。