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    細菌DNA提取使用方法是怎樣的?
    發布時間:2021-09-26 點擊量:193
       細菌DNA提取適合于從<1.5x109個細菌中提取高純度的DNA,也適合從組織、血液、分泌液或拭子等樣品提取得到寄生的微生物DNA。試劑盒基于硅膠柱純化技術,提取過程中無需使用有毒的酚氯仿抽提,也無需進行耗時的醇類沉淀,整個提取過程只需60分鐘。得到的DNA可直接用于PCR、酶切、SouthernBlot、酶切、一代測序和二代測序等實驗。該方案得到的DNA包括有基因組DNA和質粒DNA。
     
      細菌DNA提取的使用方法:
      柱式細菌DNA提取試劑盒注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數秒后使用。
      1、樣本處理(樣本處理區)
      待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
     
      2、擴增試劑準備(PCR前準備區)
      取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMDRT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1μl(也可根據每頭份用量計算N+1份FMDRT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20μl至單個PCR反應管)。
      組分每頭份用量FMDRT-PCR反應液19μlRT-PCR酶。
      1.將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區。
      2.加樣(樣本處理區)
      3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區。
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