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    DNA文庫構建的制備步驟和注意事項
    發布時間:2021-11-27 點擊量:221
       DNA文庫構建常被用于分離特定的基因片段、分析特定基因結構、研究基因表達調控,還可以用于全基因組物理圖譜的構建和全基因組序列測定等。
     
      DNA文庫構建的初步是制備大小合適的隨機DNA的片段,在體外將這些DNA的片段與適當的載體相連成重組子,轉化到大腸桿菌或其他受體細胞中,從轉化子克隆群中篩選出含有靶基因的克隆。為保證能從基因組文庫中篩選到某個特定基因,基因組文庫必須具有一定的代表性和隨機性,也就是說文庫中全部克隆所攜帶的DNA的片段必須覆蓋整個基因組。
      ps:在文庫構建中通常采用兩種策略提高文庫代表性∶一是用機械切割法或限制性內切核酸酶切割法隨機斷裂DNA,以保證克隆的隨機性;二是增加文庫重組克隆的數目,以提高覆蓋基因組的倍數。
     
      DNA文庫構建的注意事項:
      請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。
      1、操作過程請注意避免核酸樣品和產物之間的交叉污染。
     
      2、請使用不含RNA酶或DNA酶的槍頭、EP管進行試驗。
     
      3、試驗開始前,請清潔操作臺,并使用RNA酶及DNA酶清除試劑。確保沒有RNA酶和DNA的污染。
     
      4、進行文庫擴增前,請確保PCR儀已經調試好并處于穩定的狀態。
     
      5、試驗前請仔細閱讀說明書,如果需要暫停試驗,或者無需立即進行下游試驗??筛鶕f明書推薦將試驗產物保存于-20℃并安排后續試驗。
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