DNA文庫構建是指含一種生物體所有基因編碼的cDNA分子的克隆群。cDNA以組織細胞中的mRNA為模板,反轉錄合成雙鏈cDNA,各cDNA分子分別插入載體形成重組子,再導入宿主細胞克隆擴增。這些在重組體內的cDNA集合即cDNA文庫。cDNA文庫在研究個體發育、細胞分化、細胞周期調控、細胞衰老和死亡調控等生命現象的研究中具有更為廣泛的應用價值,是研究工作中常使用到的基因文庫。
DNA文庫構建實現了DNA的片段化、末端修復和3'端dA尾添加在一管內一步法完成,同時所得產物無需純化,可直接用于adapter的連接。另外,本試劑盒配備的PCR擴增試劑經過專門的優化,擴增所得DNA序列產量高,保真度好、無堿基偏好性。
本產品采用一步法的反應流程,省去了多步純化步驟,整個建庫流程僅需2.5hr;文庫轉化效率更高,可對微量DNA樣本進行高效的文庫構建。
DNA文庫構建使用注意事項:
1.操作過程請注意避免核酸樣品和產物之間的交又污染。
2.請使用不含RWA酶或DW酶的槍頭、EP管進行試驗。
3.試驗開始前,請清潔操作臺,并使用酶及W4酶清除試劑。確保沒有RW4酶和D的污染。
4.進行文庫擴增前,請確保PCR儀已經調試好并處于穩定的狀。
5.試驗前請仔細聞讀說明書,如果需要暫停試驗,或者無需立即進行下游試驗??筛鶕f明書推薦將試驗產物保存于-20℃并安排后續試驗。