Paxgene血提取提供了一種快速,簡單,經濟有效的方法,可從全血,哺乳動物細胞,細菌細胞和真菌細胞中分離總RNA。優化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統允許RNA物質基團結合到旋轉柱的玻璃纖維基質上,同時使污染物通過柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫,不用酚提取或醇沉淀。
Paxgene血提取實驗前準備及重要注意事項:
1、預防RNase污染,應注意以下幾方面:
1)使用無RNase的塑料制品和槍頭,避免交叉污染。
2)配制溶液應使用無RNase的水。
3)操作人員戴一次性防護和手套,實驗過程中要勤換手套。
2、樣品應避免反復凍融,否則影響提取RNA提取得率和質量。樣品在BufferRL中,可于-70℃保存一個月。
3、BufferRL在使用前請加入β-巰基乙醇,1mlBufferRL加10μlβ-巰基乙醇。加入β-巰基乙醇的BufferRL室溫可保存1個月。
4、使用前應按照試劑瓶標簽的說明先在BufferRW2中加入無水乙醇。
5、使用前請檢查BufferRL是否出現結晶或者沉淀,可置于于56℃水浴重新溶解。
6、本試劑盒不能用于加入抗凝劑的冷凍血液樣本RNA的提取。
7、10×BufferRBL需在使用前將溶液用無RNase的水進行10倍稀釋,稀釋后置于2~8℃保存。