• <menu id="86060"><tt id="86060"></tt></menu>
    <dd id="86060"></dd>
    <menu id="86060"><tt id="86060"></tt></menu>
  • 網站首頁新聞動態 > 細菌DNA的提取的實驗原理和使用方法
    細菌DNA的提取的實驗原理和使用方法
    發布時間:2021-03-18 點擊量:319
       細菌DNA的提取實驗原理:
      基因表達的半定量PCR檢測,真核細胞含有三類基本RNA:
      核糖體RNA(rRNA)、信使RNA(mRNA)、轉移RNA(tRNA)。
      其中mRNA傳遞合成蛋白質的全部遺傳信息,是蛋白質生物合成的中間環節,具有特殊意義。Trizol試劑可從細胞中快速提取細胞總RNA,將其中的mRNA逆轉錄成cDNA,以一對特異性引物對目的cDNA進行聚合酶鏈式反應擴增。由于每個循環中合成的引物延伸產物可作為下一循環中的模板,因而每次循環中靶DNA的拷貝數呈幾何級數增長,因此,30次PCR循環將產生約1億倍(230)的擴增片段。
      PCR技術又稱聚合酶鏈反應技術,是一種在體外(試管)擴增核酸的技術。
     
      細菌DNA的提取的特點:
      1.操作簡單,整個過程不到10分鐘(對一個樣品而言)。
      2.產率一般在3-10μg/mL過液培養細菌。
      3.OD260/280一般在1.8以上。
      4.DNA的片段長度一般在40-50Kb左右。
      5.適用范圍廣,可以使用于絕大多數細菌。
      6.也可以使用過夜培養細菌和菌落。
      7.得到的DNA可以直接用于PCR,酶切或其他分子生物學實驗。
     
      細菌DNA的提取使用方法:
      1.樣本處理(樣本處理區)
      待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
     
      2.擴增試劑準備(PCR前準備區)
      取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMDRT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1μl(也可根據每頭份用量計算N+1份FMDRT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20μl至單個PCR反應管)。
      組分每頭份用量FMDRT-PCR反應液19μlRT-PCR酶。
    QQ在線客服
    電話咨詢
    • 18612708765
    偷玩朋友的醉酒人妻中文字幕
  • <menu id="86060"><tt id="86060"></tt></menu>
    <dd id="86060"></dd>
    <menu id="86060"><tt id="86060"></tt></menu>